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豬白細胞介素-17（IL-17）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
發(fā)布時間： 2022/1/4 點擊次數(shù)： 1347次提 供 商： 研域（上海）化學試劑有限公司 資料大小： 圖片類型： 下載次數(shù)： 20 次 資料類型： DOC 瀏覽次數(shù)： 1347 次 相關(guān)產(chǎn)品： 詳細介紹： 文件下載 豬白細胞介素-17（IL-17）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍：96T
2.0pg/ml-60pg/ml
使用目的：
本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細胞介素-17（IL-17）含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中豬白細胞介素-17（IL-17）細胞介素-17（IL-17）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細胞介素-17（IL-17），再與 HRP 標記的白細胞介素-17（IL-17）抗體 ，形成抗體-抗原-。用純化的豬白酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素-17（IL-17）呈正相關(guān)。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中豬白細胞介素-17（IL-17）濃度。
試劑盒組成
豬白細胞介素-17（IL-17）酶聯(lián)免疫分析試劑盒標本要
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因 NaN3抑制辣根過（HRP）活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
計算
以標準物的濃度為橫坐標， OD值為縱坐標，在坐標紙上，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與 OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
豬白細胞介素-17（IL-17）酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有析出，稀釋時可在浴中加溫助溶，洗滌時不影響。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間好控制在 5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標準曲線，好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本 OD值大于標準品孔孔的 OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉
6．底物請避光保存。。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：2-8℃。
2．有效期：6個月
產(chǎn)品中心
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