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ELISA法測(cè)定肺炎衣原體實(shí)驗(yàn)步驟
發(fā)布時(shí)間： 2014/10/21 點(diǎn)擊次數(shù)： 919次提 供 商： 研域（上海）化學(xué)試劑有限公司 資料大小： 圖片類型： 下載次數(shù)： 164 次 資料類型： DOC 瀏覽次數(shù)： 919 次 相關(guān)產(chǎn)品： 詳細(xì)介紹： 文件下載 ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中所需要用到的試劑：
1、濃縮酶聯(lián)物； 5、弱陽性對(duì)照；
2、標(biāo)本稀釋液； 6、預(yù)包被微孔板；
3、終止液； 7、底物A、B；
4、陽性對(duì)照； 8、陰性對(duì)照。ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)過程：
1、配制洗滌液 l瓶濃縮洗滌液加475ml蒸餾水。配好的洗滌液短期內(nèi)可置室溫環(huán)境中，長(zhǎng)期可存于2—8℃環(huán)境中。
2、配制酶聯(lián)物 按1：101倍稀釋，即取1u1濃縮酶聯(lián)物加酶聯(lián)物稀釋液1 000ul(根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定稀釋量)，未用完的丟棄。
3、待試劑盒平衡至室溫后，待測(cè)標(biāo)本按1；51稀釋，即取4tA血清與200u1標(biāo)本稀釋液混合。
4、將稀釋標(biāo)本置37℃環(huán)境中20min。
5、各加100ul陽性、弱陽性、陰性對(duì)照及已稀釋待測(cè)標(biāo)本上清液于相應(yīng)孔中，空白對(duì)照孔加100u1標(biāo)本稀釋液，蓋好反應(yīng)板，置37℃環(huán)境中30min。
6、甩盡板中液體，每孔用200～300ul洗滌液洗5次，每次均需拍干。
7、每孔加酶聯(lián)物100~1，蓋好反應(yīng)板，置37℃環(huán)境中30min。
8、甩盡板中液體，洗5次，每次拍干。
9、加底物A、B各1滴或各50tzl，混勻，置37℃環(huán)境中15min。
10、取出，加終止液1滴，用酶標(biāo)儀450nm測(cè)其OD值。若肉眼觀察則不加終止液，直接判斷結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)過后，我們要做一個(gè)結(jié)果判斷：
1、陰性對(duì)照平均OD值須小于0．20。
2、弱陽性對(duì)照平均OD值須在0．20—0．65。
3、弱陽性對(duì)照與陰性對(duì)照的平均OD值之比須≥2。符合以上3個(gè)條件時(shí)，本試驗(yàn)結(jié)果可信，否則重復(fù)實(shí)驗(yàn)。
4、若待測(cè)標(biāo)本孔顯色比弱陽性對(duì)照孔深則判為陽性，反之為陰性。但在弱陽性對(duì)照值上下10％范圍內(nèi)再測(cè)1次，如確實(shí)高于弱陽性對(duì)照則可判為陽性。E-(Hu)（03）-06688 人T淋巴細(xì)胞白血病病毒Ⅰ/II(HTLV-Ⅰ/II)抗體elisa試劑盒 ，英文名： HTLV-Ⅰ/II antibody ELISA kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（03）-06689 人T細(xì)胞表面糖蛋白CD1a(CD1A)elisa試劑盒 ，英文名： CD1A ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（03）-06690 人U1小核核糖核蛋白A(SNRPA)elisa試劑盒 ，英文名： SNRPA ELISA kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（03）-06691 人UV切除修復(fù)蛋白R(shí)AD23同源物A(RAD23A)elisa試劑盒 ，英文名： RAD23A ELISA kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（03）-06692 人vav3鳥嘌呤核苷酸交換因子(VAV3)elisa試劑盒 ，英文名： VAV3 ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（03）-06693 人v-rel禽網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞過多癥病毒癌基因同源物B(RelB)elisa試劑盒 ，英文名： RelB ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（03）-06694 人Wnt-3a蛋白(WNT3A)elisa試劑盒 ，英文名： WNT3A ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（03）-06695 人Z-DNA結(jié)合蛋白1(ZBP1)elisa試劑盒 ，英文名： ZBP1 ELISA KIT ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（03）-06696 人α/β干擾素受體(IFN-α/βR)elisa試劑盒 ，英文名： Interferon α/βReceptor,IFN-α/βR ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（03）-06697 人α1防御素(DEFA1)elisa試劑盒 ，英文名： DEFA1 ELISA kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（03）-06698 人α2-HS糖蛋白(AHSG)抗體elisa試劑盒 ，英文名： AHSG antibody ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（03）-06699 人α2抗纖溶酶(α2-AP)elisa試劑盒 ，英文名： α2-Antiplasmin,α2-AP ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T